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LAMP产品快速开发的关键技术点解析

2022-12-19

环介导等温扩增(LAMP)是一种用于检测靶标DNA和RNA的恒温扩增核酸检测技术,是分子POCT领域应用最广泛的技术。LAMP扩增体系可采用多种检测方法判断结果,完美适配于分子POCT多种场景需求对仪器及试剂产品设计的要求。


瀚海新酶四年多以来,在LAMP体系优化、原料酶定向改造上持续优化,方便客户快速采用LAMP体系建立产品平台,为客户提供BST聚合酶及反转录酶RTL、预混液、冻干微球以及样本释放剂等核心原料,协助客户打造高品质分子POCT快速检测产品。

1 LAMP关键酶原料:BST DNA 聚合酶 V2

聚合速度快:
聚合速度是评价BST DNA聚合酶的一项关键指标。WS Bst DNA 聚合酶 V2(HMD7003)在使用SARS-COV-2 N基因的情况下,表现与竞品表现相当。在7天热加速实验之后,与竞品对照具有着更快的反应速度。(绿色:瀚海新酶;红色:竞品;黄色:瀚海新酶37℃7天热加速;紫色:竞品37℃7天热加速)


特异性高:
瀚海新酶的 WS Bst DNA 聚合酶 V2(HMD7003)通过与核酸适配体进行结合,封闭了室温下的酶活性,从而抑制引物二聚体引起的假阳性起峰。通过与同样进行适配体修饰的竞品在 25 ℃、37 ℃、40 ℃下的酶封闭效率测试,以及在反应温度 65 ℃下的酶活力激活效率进行对比。瀚海新酶在低温区有更好的封闭效率,在反应温度有更高的激活效率。(以下是每项温度下的相对酶活数据,非绝对酶活数据)


高盐离子耐受性强:
对比瀚海新酶 WS Bst DNA 聚合酶 V2(HMD7003)与 Company N 的 Bst Polymerase 在不同氯化钾浓度下的反应效率。瀚海新酶的产品在不同浓度区间下均有更好的表现。


2 LAMP/RT-LAMP 荧光法预混液(可冻干 & 冻干成品)

瀚海新酶在构建酶原料的同时也关注整体Master Mix的方法学开发、体系优化、引物设计和冻干工艺开发。在酶原料的性能保障下,加之稳定的冻干体系和平台,能提供量产级别的 LAMP 系列冻干试剂。

灵敏度高 & 抗抑制性强:
鼻咽拭子样本加标 SARS-COV-2假病毒样本(50 copies/T, 100 copies/T, 250 copies/T),通过瀚海新酶的样本释放剂(HMD3504)进行处理,无需提取直接进行 RT-LAMP 检测。


冻干成品试剂&性能稳定性
同样的样本,在进行冻干之后进行性能验证,冻干前后对比无差异



3 LAMP/RT-LAMP 显色法预混液(液体剂型)

鼻咽拭子样本加标 SARS-COV-2 假病毒(5000 copies/ml, 2000 copies/ml, 1000 copies/ml),通过瀚海新酶的样本释放剂(HMD3505)进行处理,无需核酸提取直接进行 RT-LAMP 检测。LAMP/RT-LAMP 显色法预混液(HMD5204)在不同样本浓度下可以 100% 检出。


4 产品选型介绍


来源:小桔灯网

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